硫氧還蛋白還原酶（TrxR）測試盒免費(fèi)待測  
    TrxR是一種NADPH依賴的包含F(xiàn)AD結(jié)構(gòu)域的二聚體硒酶,屬于吡啶核苷酸-二硫化物氧化還原酶家族成員。它和硫氧還蛋白(Trx)、NADPH共同構(gòu)成了硫氧還蛋白系統(tǒng)。硫氧還蛋白系統(tǒng)在氧化應(yīng)激、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡等過程中發(fā)揮著重要的作用。TrxR使氧化型硫氧還蛋白的殘基還原，變成一對半殘基，后者進(jìn)一步成為核糖核苷酸還原的電子供體。它存在于大腸桿菌、酵母、肝臟以及腫瘤細(xì)胞中。TrxR有很多生物學(xué)功能,與人類某些疾病的發(fā)病機(jī)制也密切相關(guān)。

一、簡介

     TrxR是二聚體黃素酶,屬于吡啶核苷酸二硫化物還原酶家族的一員,廣泛表達(dá)于從原核生物到人類的各級有機(jī)體細(xì)胞中，因分布區(qū)域不同，三種同工酶分別命名為硫氧還蛋白R1(TrxR1)(細(xì)胞質(zhì)型)、TrxR2(線粒體型)和一個主要在睪丸中表達(dá)的同工酶TrxR3(又名TGR)。胞質(zhì)型TrxR1發(fā)現(xiàn)最早，分布也較廣泛，是目前研究得最多的一種同工酶。

大多數(shù)真核生物中，主要有兩套獨(dú)立的抗氧化系統(tǒng)，一套是硫氧還蛋白系統(tǒng)，一套是系統(tǒng)。硫氧還蛋白系統(tǒng)包括NADPH、硫氧還蛋白還原酶（TrxR）和硫氧還蛋白(Trx)；系統(tǒng)包括NADPH、還原酶（GR）和谷氧還蛋白（Grx）。在這兩個系統(tǒng)中，GR和TrxR分別催化電子從NADPH傳遞到G和硫氧還蛋白，使其轉(zhuǎn)為還原態(tài)，從而參加后續(xù)多種保持氧化還原平衡的反應(yīng)，是保護(hù)細(xì)胞免受活性氧物質(zhì)損害的重要解毒機(jī)制。

哺乳動物硫氧還蛋白還原酶（TrxR）酶是一種硒蛋白家族，在其C末端氧化還原中心具有但必需的硒代半（Sec）殘基。TrxR，主要通過從NADPH提供電子以維持內(nèi)源性底物硫氧還蛋白（Trx）蛋白處于還原狀態(tài)，調(diào)節(jié)參與抗氧化防御，蛋白質(zhì)修復(fù)和轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)的各種基于氧化還原的信號傳導(dǎo)途徑。

二、生理功能

1. 調(diào)控氧化還原平衡

有研究證明了TrxR和它催化的Trx在抵御氧化應(yīng)激過程中的作用。 線粒體有氧呼吸等生理過程產(chǎn)生的超氧陰離子（O2-）通過超氧化物歧化酶（SOD）催化或自發(fā)歧化反應(yīng)產(chǎn)生大量過氧化氫（H2O2）。通過測定胞內(nèi)活性氧（ROS）發(fā)現(xiàn)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）滑膜細(xì)胞中氧化應(yīng)激增加，同時發(fā)現(xiàn)RA滑膜細(xì)胞TrxR1蛋白上調(diào)，進(jìn)一步分析顯示，細(xì)胞通過上調(diào)TrxR1而抑制了過氧化氫和RA滑膜細(xì)胞凋亡，從而保護(hù)細(xì)胞抵御氧化應(yīng)激。

1. 調(diào)控細(xì)胞生長和凋亡

TrxR活性抑制到低于正常水平會產(chǎn)生對細(xì)胞生長的抑制，核苷酸還原酶是在復(fù)制細(xì)胞或者快速生長的腫瘤細(xì)胞中特異表達(dá)的酶，細(xì)胞用TrxR抑制及等化合物處理導(dǎo)致核苷酸還原酶的抑制和細(xì)胞生長的抑制。

1. 調(diào)控早期胚胎發(fā)育

Marcus等人采用缺失線粒體TrxR1的小鼠突變體產(chǎn)生的胚胎，結(jié)果顯示TrxR2缺失的胚胎更小、極度貧血而且顯示肝臟中凋亡增加，體外培養(yǎng)的造血菌落與對照組相比急劇減少。

1. 參與其他生理過程的調(diào)控

TrxR可催化鹽產(chǎn)生硒化物，有間接抑制炎癥的作用。

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三、研究進(jìn)展

開發(fā)高效可靠的工具對于探索基本的生物過程至關(guān)重要，一種特別有用的工具是小分子熒光探針，這使人們越來越關(guān)注設(shè)計和開發(fā)用于生物大分子，無機(jī)離子，生物小分子和各種反應(yīng)性信號物種的各種化學(xué)探針。一般而言，探針的質(zhì)量對于探究復(fù)雜的生物系統(tǒng)以及從實(shí)驗觀察中得出令人信服的結(jié)論至關(guān)重要，因為質(zhì)量差的探針可能會產(chǎn)生模糊甚至誤導(dǎo)的結(jié)果和結(jié)論。期望的探針應(yīng)該以適當(dāng)?shù)捻憫?yīng)速率和高特異性識別感興趣的靶標(biāo)，這將保證探針被有把握地應(yīng)用以給出特定生物事件的精確和實(shí)時解剖。先前的研究報道了一系列TrxR熒光探針，包括TRFS-green，TRFS-red和Mito-TRFS。TRFS-green是TrxR的第一個綠色發(fā)光熒光探針。

TRFS-green的反應(yīng)機(jī)制

然而，TRFS-green對酶的響應(yīng)速度較慢，即使使用三（2-羧乙基）膦（TCEP）作為還原劑，也需要超過2小時才能達(dá)到最大熒光信號。2019年6月21日，蘭州大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院房建國團(tuán)隊在Nature Communications上發(fā)表題為“A fast and specific fluorescent probefor thioredoxin reductase that works via disulphide bond cleavage"的文章，系統(tǒng)地研究了通過調(diào)整TrxR連接單元和識別部分來確定探針響應(yīng)速率和選擇性的結(jié)構(gòu)因素。在Fast-TRFS的幫助下，開發(fā)了一種方便的測定法，使用粗細(xì)胞提取物作為TrxR的來源篩選TrxR抑制劑，并且已經(jīng)鑒定了數(shù)十種天然產(chǎn)物作為TrxR抑制劑。

生化試劑盒可以檢測的樣本類型有哪些?
  生化試劑盒的實(shí)驗原理是基于化學(xué)反應(yīng),理論上是不受生物種屬及樣本類型的限制。生化試劑盒樣本檢測通常只分樣本類型,不分種屬。但是某些指標(biāo)在不同種屬或類型樣本中的提取方式不同。因此,具體情況請參見說明書或與技術(shù)支持聯(lián)系確認(rèn)。

生化試劑盒樣本檢測的一般要求:
1)于生化檢測而言,樣本無溶血、脂血、的現(xiàn)象。組織樣本需將血液洗凈擦干后再進(jìn)行稱重處理。
2)樣本處理后盡快進(jìn)行檢測,且保存于冰盒之上,待測。
求
3)樣本需澄清,若不澄清,需離心后取上清進(jìn)行檢測(特殊指標(biāo)除外)。
4)樣本值應(yīng)在試劑盒線性范圍內(nèi),若超過線性范圍,需稀釋后再進(jìn)行檢測,若低于檢測范圍,需增加樣本濃度后進(jìn)行檢測。

如何進(jìn)行預(yù)測定?
(1)務(wù)必在7個工作日內(nèi)進(jìn)行預(yù)測定,以確定該試劑盒是否適合您的樣品,以免造成試劑盒和樣品的浪費(fèi)。
(2)選擇2~3個預(yù)期差異比較大的樣品,嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作,注意儀器工作狀態(tài),操作規(guī)范,控制好測定條件,尤其是溫度。
(3)如實(shí)與公司銷售溝通預(yù)測定結(jié)果,公司技術(shù)人員會確認(rèn)測定結(jié)果是否正常,是否需要調(diào)整,如何進(jìn)行調(diào)整,從而確保您的測定結(jié)果可靠。